通过光谱编码的细胞条形码进行高维多通道流式细胞术

　　作者：

　　谢尔登 J. J. Kwok,莎拉·福沃德,玛丽莎·法尔伯格,埃曼妮·罗斯·阿西塔,肖恩·科斯格里夫,李承亨,杰弗里·阿博特,朱晗,尼古拉斯·米纳西安,A. 肖恩投票,尼古拉·马蒂诺 & 锡贤云

　　摘要

　　免疫学、免疫肿瘤学、药物发现和疫苗开发的进步需要改进流式细胞术的能力，使其能够在多个时间点测量每个细胞的更多蛋白质标志物。然而，荧光团标记物组合的大小受到荧光发射光谱重叠的限制，流式细胞仪通常在一个时间点进行细胞测量。在这里，我们描述了多通道高维流式细胞术，这是一种通过发射近红外激光的微粒利用细胞条形码来跟踪和重复测量每个细胞的方法，使用更多的标记物和更少的颜色。通过使用活的人外周血单核细胞，我们表明该方法能够在刺激前后对相同的细胞进行时间分辨表征，通过 10 个标记物面板进行分析，对光谱溢出的补偿最小，并通过 32 个标记物面板进行深度免疫表型分析，其中相同的细胞在 3 个背靠背循环中分析，每个周期 10-13 个标记， 减少整体溢出并简化标记面板设计。流式细胞术中的细胞条形码扩展了该技术在高维多通道单细胞分析中的实用性。